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Cromatografia em coluna

A cromatografia em coluna aplica os mesmos princípios da CCD em uma escala maior. Na cromatografia em coluna, uma coluna de vidro é preenchida com uma fase estacionária (normalmente, sílica-gel) e a mistura de compostos a serem separados é colocada em seu topo. Em seguida, uma fase móvel (solvente) é escoada pela coluna de cima para baixo. Da mesma forma que na CCD, a taxa na qual cada composto da mistura desce pela coluna depende de suas atrações relativas às fases estacionária e móvel. Versão original criada por Sal Khan.

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Transcrição de vídeo

RKA10C Bem-vindos à nossa videoaula! Falamos sobre cromatografia de camada fina, um método que é usado para determinar quantas substâncias estão contidas em uma amostra, ou talvez as suas propriedades relativas, a polaridade relativa das substâncias contidas na amostra. Você basicamente coloca uma amostra, geralmente uma camada fina de sílica-gel, que é a fase estacionária, e então você coloca uma fase móvel aqui embaixo, neste caso, pode ser menos polar, e este solvente sobe no sílica-gel. Conforme se move, você percebe que o solvente irá reagir com a amostra original e irá subir com esta fase móvel. Se algum componente da amostra original for um composto mais polar, será mais difícil de se mover, pois será atraído para a fase estacionária e menos atraído para a fase móvel. Então, ele se moverá menos. O composto que é menos polar não será tão atraído pela fase estacionária e será mais solúvel na fase móvel, que é menos polar. E ele irá mais longe. Neste vídeo, vou apresentar um método muito semelhante, no qual as coisas simplesmente se movem em uma direção diferente. É o método de cromatografia em coluna. Na cromatografia em coluna, digamos que você tenha algum tipo de tubo de ensaio, algum tipo de coluna, que normalmente verá com uma pequena torneira pintada aqui, para você ver o que sai do fundo. Mas o que você faz? Você preenche com aquela fase estacionária que, de novo, muitas vezes é um sílica-gel, e isso será muito polar. Esta é a sua amostra original. Você vai colocar o solvente aqui. E o que você acha que vai acontecer? A fase móvel começará a descer durante a fase estacionária e interagirá com sua amostra. Os componentes mais polares da sua amostra serão mais atraídos para a fase estacionária, portanto, eles se moverão menos. As partes mais polares da sua amostra podem chegar talvez até aqui, enquanto as partes menos polares da sua amostra serão menos atraídas pela fase estacionária e se moverão mais com a fase móvel. O mais importante é lembrar que a diferença entre os dois métodos de cromatografia é apenas na direção em que a amostra está se movendo. Na cromatografia em camada fina, o composto mais polar é o ponto inferior, enquanto na cromatografia em coluna, o ponto mais polar está na camada superior aqui. Claro, tudo depende da polaridade da fase estacionária e da relativa polaridade do solvente da fase móvel. Mas o que mostrei é o caso geral. Lembre-se de que, se você for assistir à cromatografia de camada fina ou à cromatografia em coluna, o importante é prestar atenção na direção do deslocamento das amostras. Assim, terminamos a nossa aula. Até mais!